EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU标记培养基；(b)提前将2xEdU标记培养基预热，然后等体积加入到细胞原有培养基中，获得lxEdU溶液，其中EdU的终浓度为10uM；注：1)我们不建议替换全部培养基，因为这样可能会影响细胞增殖的速度；2)配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜；(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时，弃培养基；注：1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态；2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次，毎次5分钟，以除去未掺入DNA的EdU残留。注：贴壁不牢的细胞可降低清洗强度上海EdU细胞增殖检测试剂盒的价格是多少？上海如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒评价
按照以下的表格进行染色反应液的配制：染色反应液组分500μl1ml2ml5ml1×反应缓冲液430μl860μlmlml催化剂溶液20μl40μl80μl200μlTAMRA红色荧光溶液μlμl5μlμl缓冲添加剂50μl100μl200μl500μl3、每孔加入100μl配置好的检测混合液，以覆盖细胞为宜，避光、室温孵育30分钟；4、弃染色反应液，加入100μlTritonX-100细胞渗透液清洗2-3次，每次10分钟；5、弃细胞渗透液，用PBS洗两次，每次5分钟。DNA染色1、将Hoechst33342用RNase-free水溶液1：1000进行稀释得到终浓度为5μg/ml的1×Hoechst染色液；2、每孔加入100μl1×Hoechst染色液，室温避光孵育20-30分钟后，弃染色液；3、每孔加入100μlPBS洗细胞两次，去掉洗液。图像获取及分析建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察；如果条件限制，请于4°C条件下避光湿润保存3天之内完成拍照。若为细胞爬片或涂片，可使用抗荧光淬灭封片剂进行封片后于4°C条件下保存及拍照检测。上海哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒评价EdU细胞增殖检测试剂盒常见的用途有哪些？上海东寰告诉您。
EdU细胞增殖检测试剂盒更准确--无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)，可有效避免变性带来的样品损伤，确保细胞核边缘清晰完整；更简单--无需抗原抗体反应，基于小分子化学反应的检测方法，简单高效，反应单需要几分钟；更灵敏--无需抗体，检测染料单为BrdU抗体的1/500，更容易扩散，即使单个增殖细胞也能准确检测；更快速--无需过夜，省却了抗原抗体反应的复杂繁琐步骤，完成整个检测周期单需2.5小时；更兼容--对样品几乎无损伤，更容易与多种抗体或荧光蛋白同时标记，能够同时检测细胞其他性状特征
该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测，适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理，固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中，通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应，把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面，这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性，广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。EdU细胞增殖检测试剂盒应用再哪些地方？
保存条件：4℃或-20℃保存，MTT需避光保存，一年有效；MTT配制成溶液后需-20℃避光保存；Formazan溶解液也可以室温保存。注意事项：由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。一方面，由于96孔板周围一圈容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加PBS，水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。MTT溶剂在低温情况下会凝固，使用前请室温放置或20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。MTT配制成溶液后为黄色，需避光保存，长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时，请勿使用。MTT溶液在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。使用EdU细胞增殖检测试剂盒前的安全检查。上海如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒评价
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4%多聚甲醛固定液或冷**固定液(-20℃预冷20min)。d,封闭液。e,／LPBS缓冲液。2、染色方法a,取出培养有细胞的盖玻片，用洗2-3遍。b,加入4%多聚甲醛试问固定30minc.加入的Tritonx-100,37℃,5min，PBS洗两次，5min/次d.加入含、1%BSA的PBS中室温封闭30min-1h。e.去封闭液，直接加入一抗，37℃孵育1h或4℃过夜。抗体以mo/LPBS稀释(理想的抗体浓度需经试验而定)。，10min/次g.加入FITC-二抗或TRITC-二抗，37℃，孵育1h。，10min/次，用滤纸吸干。(PBS配制)封片。j.免疫荧光显微镜下观察，或于4℃避光保存。免疫荧光双标记方法免疫荧光的双标记是指同时标记细胞内两种蛋白质分子，当怀疑某种配体与已知受体结合后可用此方法加以证明。此方法稍微复杂一些，应注意所用的一抗是来自不同种属动物的两种特异性抗体(例如：A抗体为多克隆抗体，来自家兔；B抗体为单克隆抗体，来自小鼠)。其次，两种二抗所带荧光素的发射光不应重叠，且尽量远离，通常可以选择FITC和TRITC、Alex488和TRITC、FITC和Cy5，或Cy3和Cy5等来组合。通常情况下，染色时两种一抗可以同时孵育，然后可以同时孵育两种二抗。但当染色结果一种颜色非常弱，而另一种颜色比较强时，应考虑先孵育颜色较弱的二抗。上海如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒评价
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